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了解新冠病毒的【常规检测】和【快速检测】

发布时间:2022-04-27



了解新冠病毒的【常规检测】和【快速检测】



一、核酸检测的原理



核酸检测即利用荧光
PCR
技术检测生物体核酸的过程。(PCR,全称为聚合酶链式反应)。我们在采集咽拭子的时候,只采集非常少量的液体。然后看这非常少的液体里面有没有新冠病毒,如果没有或者非常少,就判定为阴性。里面如果病毒很多,就判定阳性。这是理想的情况。但事实是,即使新冠患者,也不会体液里面密密麻麻都是病毒,可能就是非常稀松的分散着,也就是浓度很低。浓度不高,就很难检测到,所以就想办法增加浓度。



如何增加浓度呢?就是利用
PCR
的手段。



PCR 技术能够利用特殊的酶在生物体外进行 DNA 片段复制,将特定的 DNA 片段扩增放大,从而达到能够检测的目的。也就是让病毒的遗传物质翻倍,怎么知道翻了多少倍呢?用
Ct
值(循环数阈值)表示。如
Ct20
,就是220次方倍;Ct40,就是240次方倍。



新冠病毒的核酸物质是 RNA,因此检测过程中首先要把 RNA 进行逆转录变成 DNA 后才能进行检测。随后由变性、退火、延伸三个基本反应步骤进行。



变性:DNA 双链(模板)打开,变成单链 DNA



退火:特定引物(DNA 小片段)与单链 DNA 互补配对结合;



延伸:单链 DNA 合成双链 DNA(半保留复制,在复制产生的两条子代 DNA 双链链中包含一条来自亲代 DNA 的单链和一条新合成的 DNA 单链)。



随后,重复循环以上三个步骤,获得更多的半保留复制链,成为下个循环的模板,从而使原始微量
DNA
模板特定区域得到指数级增加,放大几百万倍。





二、常规检测和快速检测的区别



简单来说,常规 PCR 检测在样本采集后需要进行核酸纯化再进行后续
PCR
反应,纯大概需要约
30 ~ 60 min
。通常一块反应板中可够容纳
96
个独立的反应同时进行,(最多检测
91
个样本,外加
5
个质控样本),PCR
反应时间需要约
2
小时左右。而快速检测在样本采集后直接放入裂解液中释放核酸,通常无须进行核酸纯化可以直接进行
PCR
反应,使用快检专用仪器,检测所需时间在
0.5 ~ 1.5
小时左右。



快速检测一般通量较小(每批次 2 ~ 16 个样本),虽然单个样本检测时间缩短了,但进行大批量样本检测时,报告时间不占优势。例如要检测
100
个样本,16
通道检测需进行至少
7
批次,2
通道检测
50
批次。



因此,快速检测适用于因特定原因需尽快获得检测结果、待检人群数量较少、实验室空间场地限制的情况。但对于高风险人群的检测以及大规模人群筛查还是推荐使用常规检测。

























(以上内容来源于网络)